DMEM/F-12（Dulbecco's Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12）是一种广泛使用的基础培养基，可用于支持很多不同种类的哺乳动物细胞生长。已在 DMEM/F-12 中成功培养的细胞包括 MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞及大鼠成纤维细胞。

用 DMEM/F-12
DMEM/F-12 是 DMEM 和 Ham's F-12 的 1:1 混合物。该配方包含 DMEM 的高浓度葡萄糖、氨基酸及维生素与 F-12 的多种组分。含有 L-谷氨酰胺补充剂的 DMEM/F-12 具有易于使用的包装形式，可显著减少有毒氨的积累，改善细胞活力和生长。DMEM/F-12 不含蛋白质、脂质或生长因子。因此，DMEM/F-12 可能需要补充营养成分，通常需要添加 10% 胎牛血清 (FBS)。DMEM/F-12 使用碳酸氢钠缓冲系统，因此需要 5–10% CO₂ 的环境来维持生理 pH 值。

葡萄糖： 基本碳源，提供能量。高糖（4.5 g/L）适用于培养能量需求高的细胞。

酚红：pH指示剂，通过颜色变化，观察培养基消耗情况，是雌激素类似物，因此雌激素相关研究避免使用，显色以及荧光相关实验也避免使用。

L-谷氨酰胺：蛋白质和核酸合成必须成分。低温易沉淀，37℃易分解，分解产生对细胞有毒性的氨，避免反复加热。

丙酮酸钠：补充碳源，提供能量。三羧酸循环的产物，代谢旺盛的细胞添加效果较好。