宿主/亚型

             山羊/IgG

用法

1:5000-1:100000 (WB);1:3000-1:5000(ELISA);1:300-1:3000(IP);

1:100-1:1000 （IHC(P)）

WB 分 析 A549 (Lane 1) 和 Hep G2 (Lane  2)CacyBP 表达。30 µg 细胞裂解物上样电泳并转 膜，5%脱脂奶粉封闭后用Rabbit Anti-alpha Tubulin 多 抗 (1 µg/mL) 孵 育 ， 二 抗 Goat anti-Rabbit IgG-HRP(#GRB2110)以不同稀释比例（1:10000  (Fig. 1)， 1:100000 (Fig. 2)和 1:200000 (Fig. 3)） 孵育，最后用 ECL 显色检测。

直接 ELISA 分析检测兔抗 FLAG Tag 单抗。 1  µg/mL 重组 N-terminal FLAG-tagged ubiquitin 蛋白 100 µL/孔包被过夜，BSA 封闭后洗涤 3 次，然后向 每孔添加 100μL 不同浓度的兔抗 FLAG Tag 单抗 （500, 250, 125, 62.5, 31.25, 15.62, 7.8, 3.9, 1.9,  0.9, 0.4 和 0 ng/mL），室温孵育 2 小时，酶标板洗 涤后 每孔加 入 100 μL 1:10,000 稀释 的 goat  anti-rabbit IgG-HRP (#GRB2110)室温孵育 60 分 钟，洗涤后加入 100 µL/孔 TMB ELISA 底物室温显 色 15 分钟，加入 100μL ELISA 终止液终止反应， 酶标仪检测。