蛋白质透析、脱盐和浓缩

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在细胞裂解或分离之后,裂解物经常包含与下游步骤不兼容的污染物。我们提供多种装置和树脂,以便简单高效的脱盐、缓冲液置换以及从样本中去除去垢剂。此外,如果蛋白质浓度过低而不适于后续实验和分析,您可以使用离心浓缩管快速浓缩样本。



透析装置、透析卡、96孔微量透析板及透析袋脱盐离心柱、96孔离心板和色谱预装柱蛋白浓缩管去垢剂去除离心柱和96孔离心板
样本体积处理范围10 μL–250 mL2 μL–4 mL100 μL–100 mL25 μL–1 mL
样本处理时间(取决于样本体积)2–24 hrs5–10 min5–30 min*15–20 min
关键应用缓冲液置换、脱盐、病毒纯化脱盐、缓冲液置换、去除未结合的标记物样本浓缩、脱盐、缓冲液置换去除阴离子、非离子和两性离子型去垢剂
推荐的样本类型纯化的蛋白质裂解物或纯化的蛋白质裂解物或纯化的蛋白质纯化的蛋白质或肽段混合物
是否适用于浑浊样本?
处理过程样本是否受到稀释?可能
是否可选用伽马射线照射?

* 针对于10K MWCO(取决于不同的装置——其它截留分子量的处理时间可能不同)

一.  透析装置、透析卡、96孔微量透析板及透析袋

Thermo Scientific透析装置可对10 μL ~ 250 mL样本实现快速、无损透析。与标准的扁平透析袋不同,上述新型装置无需使用可能导致渗漏和样品损失的结扣或夹子。

Pierce 96孔微量透析板和Slide-A-Lyzer微量透析装置非常适合处理小体积样品,Slide-A-Lyzer透析卡(原版和G2)适合处理中小体积样品,而Slide-A-Lyzer透析瓶则适合处理较大体积样品。特点:

· 卓越的样品回收率 — 相较于过滤和树脂体系,低结合性的塑料和膜可以最大程度的减少样品损失

· 方便 — 易于握持,方便使用注射器和/或移液器进行加样和取样。

· 安全 — 密封膜有助于防止渗漏,而透析袋和自制装置可能产生渗漏

· 经过验证 — 每个产品装置在生产过程中都通过了漏液试验。

1. 选择适合您实验的透析装置


Pierce 96孔微量透析板Slide-A-Lyzer微量透析装置Slide-A-Lyzer透析卡(原版)Slide-A-Lyzer G2透析卡Slide-A-Lyzer透析瓶
需要外部浮子?不需要不需要需要不需要自选
加样或取样方法移液器移液器注射器移液器或注射器移液器
容量范围10–100 μL10 μL–2 mL0.1–30 mL0.25–70 mL150–250 mL
不同体积容量的装置数目13451
截留分子量(MWCOs)3.5K以及10K2K(仅0.1 mL规格)、3.5K、10K以及20K2K、3.5K、7K(仅0.1 mL和0.5 mL)、10K以及20K2K、3.5K、7K(仅0.1 mL和0.5 mL)、10K以及20K2K、3.5K、10K以及20K
自动化兼容?
具有缓冲液储备槽?是,除了0.1 mL规格
是否经伽马射线处理?是,仅10K是,仅10K
截留分子量(MWCO)通过颜色区分?

1)为实验选择合适的Slide-A-Lyzer MINI设备

用0.5 mL或2 mL Thermo Scientific Slide-A-Lyzer MINI透析设备进行样品透析

MWCO Membrane10–100 μL100–500 μL0.5–2 mL
2KCatalog numbers
69580
69553
Not availableNot Available
3.5KCatalog numbers
69550
69552
Catalog numbers
88400
Catalog numbers
88403
7KCatalog numbers
69560
69562
Not availableNot Available
10KCatalog numbers
69570
69572
Catalog number
88401
Catalog number
88404
20KCatalog numbers
69590
69555
Catalog number
88402
Catalog number
88405

2)Slide-A-Lyzer 透析卡

image.png


Volume range
Molecular weight cut off0.1–0.5 mL0.5–3 mL3–12 mL12–30 mL
2KCatalog number
66205
Catalog number
66203
Catalog number
66212
Catalog number
66230
3.5KCatalog number
66333
66335 (kit)
Catalog number
66330

66332 (kit)
Catalog number
66110

66107 (kit)
Catalog number
66130
7KCatalog number
66373
Catalog number
66370

66372 (kit)
Catalog number
66710

66707 (kit)
Not available
10KCatalog numbers
66383, 66384

66385 (kit)
Catalog numbers
66380, 66381

66382 (kit)
Catalog numbers
66810, 66811

66807 (kit)
Catalog number
66830
10K
(gamma irradiated)
Catalog number
66454
Catalog number
66455
Catalog number
66453
Catalog number
66456
20KCatalog number
66005
Catalog number
66003
Catalog number
66012
Catalog number
66030

3)Slide-A-Lyzer G2 透析卡

image.png


Volume range
Molecular weight cutoff0.25–0.5 mL1–3 mL5–15 mL10–30 mL25–70 mL
2KCatalog number
 87717
Catalog number
 87718
Catalog number
 87719
Catalog number
 87720
Catalog number
 87721
3.5KCatalog number
87722
Catalog number
87723
Catalog number
87724
Catalog number
87725
Catalog number
87726
7KCatalog number
87727
Catalog number
87728
Not availableNot availableNot available
10KCatalog number
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Catalog number
87730
Catalog number
87731
Catalog number
87732
Catalog number
87733

10K

(gamma irradiated)

Catalog number
88250
Catalog number
88251
Catalog number
88252
Catalog number
88253
Catalog number
88254
20KCatalog number
87734
Catalog number
87735
Catalog number
87736
Catalog number
87737
Catalog number
87738

二. Zeba 脱盐产品

Zeba脱盐产品使用专有的高性能树脂,具有卓越的脱盐和蛋白回收性能。即使丰度很低的蛋白样品也可以进行高效的脱盐处理,具有高水平的蛋白回收率,对盐和其他小分子的截留率(即去除率)高于95%。特点:

· 高效——专有的树脂具备出色的蛋白回收率和干扰物去除率

· 灵活——根据需求提供一系列的产品形式,包括离心柱、过滤离心多孔板和色谱柱

 快速·——无需坐等蛋白重力排出,也无需检测流份

· 经济——提供比其他市售产品更优的性价比

1. Zeba 脱盐离心柱

FormatMicro Spin Column0.5 mL Spin Column2 mL Spin Column5 mL Spin Column10 mL Spin Column
Resin bed
volume
75 μL0.5 mL2 mL5 mL10 mL
Volume capacity
(7K MWCO)
2–12 μL30–130 μL200–700 μL500–2000 μL700–4000 μL
Volume capacity
(40K MWCO)
5–14 μL70–200 μL200–900 μL300–2000 μL1000–4000 μL
7K MWCO pack sizesCatalog numbers
89877, 89878
Catalog numbers
 89882, 89883
Catalog numbers
 89889, 89890
Catalog numbers
 89891, 89892
Catalog numbers
 89893, 89894
40K MWCO pack sizesCatalog numbers
 87764, 87765
Catalog numbers
87766, 87767
Catalog numbers
87768, 87769
Catalog numbers
 87770, 87771
Catalog numbers
 87772, 87773

2. Zeba 96孔离心板和色谱预装柱

货号

产品名称

规格

89807Zeba Spin Desalting Plates, 7K MWCO2 plates
89808Zeba Spin Desalting Plates, 7K MWCO4 plates
87774Zeba 96-well Spin Desalting Plates, 40K MWCO2 plates
87775Zeba 96-well Spin Desalting Plates, 40K MWCO4 plates
89934Zeba Desalting Chromatography Cartridges, 7K MWCO, 1 mL5 x 1 mL
89935Zeba Desalting Chromatography Cartridges, 7K MWCO, 5 mL1 x 5 mL

三. 蛋白浓缩管

Thermo Scientific Pierce浓缩管为一次性超滤离心管,采用聚醚砜(PES)膜进行生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换。可提供四种体积规格(0.5 mL、6 mL、20 mL和100 mL),并涵盖多种截留分子量(3K、5K、10K、30K和/或100K MWCO)。特点:

· 快速处理—使用10K MWCO浓缩管时,可在5-30分钟内将样本浓缩10-30倍(浓缩所需的时间可能会随截留分子量不同而有所变化)

· 高效回收— 在去除污染物或置换缓冲液的同时,可回收>90%的蛋白质样品

· 方便使用—带有醒目标记、宽样品槽和可拆卸的过滤槽,便于轻松操作

· 广泛兼容—与标准离心机的定角转头和水平转头均可兼容

截留分子量(MWCO)0.1 mL–0.5 mL 容量1 mL–6 mL 容量5 mL–20 mL 容量20 mL–100 mL 容量
3,000 MWCO8851288514, 8851588525, 88526
5,000 MWCO


88534
10,000 MWCO8851388516, 8851788527, 8852888535
30,000 MWCO8850288521, 8852288529, 8853188536
100,000 MWCO8850388523, 8852488532, 8853388537

四. 用于质谱分析的C18柱和多肽脱盐柱

多肽分离后,可使用反相(RP)树脂去除盐和缓冲液,其中C18基质是用于捕获疏水肽最理想基质。多肽在高水相流动相中与反相柱结合,盐和缓冲液被洗去,然后用高有机相流动相洗脱多肽。然而,包括磷酸化多肽在内的亲水肽可能不能与C18树脂很好地结合,因此建议使用石墨离心柱,可更好地进行回收。但是,C18和石墨树脂不能有效去除去垢剂,这会组分污染仪器并干扰多肽与色谱柱的结合、洗脱和电离。Thermo Scientific去垢剂去除产品可有效地结合并去除样品处理过程中常用的各种高浓度组分。

· 种类丰富——树脂和试剂盒可用于多种多肽纯化策略

· 经过优化—所有产品均旨在最大限度地提高多肽得率和LC-MS兼容性

· 方便—易用的离心吸头和离心柱可更快速地纯化多肽

· 灵活——装置可以与培养的哺乳动物细胞或组织一起使用

· 经过验证——所有的产品均已经过全面的测试,样品也在Thermo Scientific质谱仪平台上做过进一步分析验证


Pierce 多肽脱盐柱Pierce C18 吸头Pierce C18 离心柱Pierce C18 离心吸头石墨离心柱
主要应用采用微量离心机进行高通量多肽脱盐采用微量离心管进行多肽脱盐采用微量离心机进行多肽脱盐采用微量离心机和 Stage 吸头进行多肽脱盐采用微量离心机进行磷酸化多肽脱盐
规格离心柱吸头离心柱离心吸头离心柱
最大结合容量5 mg10 µg 或 80 µg30 µg10 µg100 µg
最大上样体积300 µL10 µL 或 100 µL150 µL20 µL500 µL
处理时间15 min5 min25 min5-10 min10 min
货号

89851

89852

87782

89870

89873

84850

88302

用于质谱分析的其他多肽纯化和去垢剂去除产品

货号产品名称规格
87777Pierce Detergent Removal Spin Column, 0.5 mL25 columns
88304Pierce Detergent Removal Spin Plates2 plates
88305HiPPR Detergent Removal Spin Column Kit5 mL
88306HiPPR Detergent Removal Spin Columns, 0.1 mL24 columns
87776Pierce Detergent Removal Spin Column, 125 µL25 columns
87778Pierce Detergent Removal Spin Column, 2mL5 columns
87779Pierce Detergent Removal Spin Column, 4mL5 columns
87780Pierce Detergent Removal Resin10 mL
88307HiPPR Detergent Removal 96-well Spin Plates, 0.1 mL2 plates



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